紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機(jī)械、冶金、石油、食品、生物、材料、計(jì)量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個(gè)方面,用來進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究等。因?yàn)閮x器涉及到光學(xué)、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等,所以它需要在一定的環(huán)境中應(yīng)用。
紫外分光光度計(jì)的校正內(nèi)容:
1、波長的準(zhǔn)確度試驗(yàn) 以儀器顯示的波長數(shù)值與單色光的實(shí)際波長值之間誤差表示,應(yīng)在±1.0nm范圍內(nèi)。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進(jìn)行校正;
2、吸收度的準(zhǔn)確度試驗(yàn);
3、雜散光的試驗(yàn);
4、波長重現(xiàn)性試驗(yàn);
5、分辨率試驗(yàn)。
吸光度的校正方法:校正吸光度常用一很純物質(zhì)一定濃度的溶液為標(biāo)準(zhǔn),且此溶液的吸光度系數(shù)經(jīng)不同實(shí)驗(yàn)室核對,為了使標(biāo)準(zhǔn)液吸光度不受測定波長的微移動(dòng)而有改變,常選擇具有較平滑吸收高峰的物質(zhì),同時(shí)要求溶液穩(wěn)定,且在相當(dāng)?shù)牟ㄩL范圍內(nèi)吸收度的改變符合Beer-Lambert定律,常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是較常用的標(biāo)準(zhǔn)溶液,此溶液在紫外區(qū)和可見區(qū)均適用。
波長或波數(shù)的校正方法:可用具有窄吸收帶的溶液,濾光片或蒸氣來校正所需要的光波范圍。如果要求很高的精密度時(shí),可用放電燈泡發(fā)射的射線來校正。有的光譜儀其上已裝有一個(gè)為校正用的燈。苯的蒸氣對校正一定范圍的波長亦很有用,可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中,測其吸收波長,在遠(yuǎn)紫外區(qū)可用氧氣的吸收帶進(jìn)行校正。用各種稀土金屬的濾光片,可以很快地校正波長,但準(zhǔn)確度不如上述方法高。常用含有鈥和釹、鐠離子的濾光片。
雜散光的校正方法:小量的雜散光往往會(huì)引起較大的測量誤差,它的校正可用一個(gè)能*吸收某一波長單色光,且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個(gè)溶液所表現(xiàn)的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來檢查,但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現(xiàn)的透射比可得出近似的雜散光百分?jǐn)?shù)。若所含雜散光大于0.1%,應(yīng)設(shè)法減低,或?qū)y得的吸收光度進(jìn)行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計(jì)算而得。此外,還可用一個(gè)適當(dāng)?shù)臑V光片,該濾光片在測定波長范圍內(nèi)*透光,但吸收此范圍外的光波,由此來消除雜散光。